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Q33226——Thermo Qubit4 熒光計(Qubit 4 Fluorometer)用戶指南

更新時間:2025-04-23      點擊次數:842

Q33226——Thermo Qubit4 熒光計(Qubit 4 Fluorometer)用戶指南

——精準、高效、多功能的核酸與蛋白質定量解決方案

一、產品概述

Qubit 4 熒光計(貨號:Q33226)是賽默飛世爾科技(Thermo Fisher Scientific)推出的新一代臺式熒光定量儀,專為精準測量DNA、RNA和蛋白質濃度設計。其核心參數如下:

  • 檢測范圍:10 pg/μL DNA、12.5 μg/mL 蛋白質(1 μL樣本量)

  • 檢測時間:<3秒/樣本(DNA/RNA/蛋白質),<5秒/RNA完整性(RNA IQ法)

  • 動態范圍:5個數量級

  • 光源:藍光LED(470 nm)、紅光LED(635 nm)

  • 激發/發射濾光片:藍光(430–495 nm激發,510–580 nm發射)、紅光(600–645 nm激發,665–720 nm發射)

  • 檢測器:光電二極管(300–1000 nm)

  • 顯示與存儲:5.7英寸彩色觸摸屏,最多存儲1000個樣本數據

  • 連接性:USB、WiFi、U盤

二、技術優勢

  1. 高靈敏度與特異性

    • 熒光染料:僅與目標分子(DNA、RNA、蛋白質)結合后發射熒光,避免游離核苷酸或降解核酸的干擾。

    • 低濃度檢測:可精確檢測低至10 pg/μL的DNA和12.5 μg/mL的蛋白質,適用于珍貴或低濃度樣品。

  2. 快速與便捷

    • RNA IQ法:5分鐘內完成RNA完整性和質量檢測,較傳統微流體芯片法(如Agilent 2100)縮短85%時間。

    • 操作簡化:僅需將樣品加入工作液,混合后放入儀器檢測,無需復雜預處理。

  3. 多功能與擴展性

    • 內置試劑計算器:自動計算所需染料和緩沖液用量,減少人為誤差。

    • 個性化檢測:支持MyQubit軟件自定義檢測程序,可定量膽固醇、葡萄糖等小分子。

  4. 數據管理與導出

    • 多語言界面:支持中、英、法、德等7種語言。

    • 數據傳輸:通過USB、WiFi或U盤導出數據,兼容Thermo Fisher Connect云平臺。

三、操作指南

(一)實驗前準備
  1. 設備檢查

    • 確保儀器放置在平穩、干燥的臺面上,避免陽光直射。

    • 檢查電源適配器、USB驅動器(4 GB)、屏幕擦拭布是否齊全。

  2. 試劑準備

    • 使用Qubit試劑盒(如dsDNA HS、RNA IQ等),按說明書稀釋工作液。

    • 確保試劑在有效期內(6個月內),且避光保存。

  3. 樣本準備

    • DNA/RNA/蛋白質樣本需純化,避免鹽類、酚類等抑制劑干擾。

    • 樣本量建議1–20 μL,濃度超出范圍時可稀釋后檢測。

(二)實驗操作
  1. 開機與預熱

    • 連接電源適配器,按下電源鍵,預熱時間<35秒。

  2. 選擇檢測程序

    • 觸摸屏選擇對應試劑盒類型(如dsDNA HS、RNA IQ)。

    • 如需自定義檢測,使用MyQubit軟件創建.qbt文件并上傳。

  3. 樣本檢測

    • 將樣本加入工作液,混合后轉移至Qubit檢測管。

    • 將檢測管放入儀器,點擊“Read Tube",3–5秒后顯示結果。

  4. 數據記錄與導出

    • 結果顯示濃度值(ng/μL或μg/μL)及質量評分(如RNA IQ#)。

    • 通過USB或WiFi導出數據至Excel或Thermo Fisher Connect。

(三)實驗后維護
  1. 清潔與消毒

    • 使用屏幕擦拭布清潔觸摸屏,避免液體接觸儀器內部。

    • 檢測管可高壓滅菌或75%乙醇消毒。

  2. 長期存放

    • 長期不使用時,關閉電源并覆蓋防塵罩。

四、使用技巧與高效操作

  1. 樣本優化

    • DNA/RNA:建議濃度范圍10–1000 pg/μL(DNA)或0.5–1.5 μg/μL(RNA)。

    • 蛋白質:使用BCA法或Bradford法預估濃度,避免過高導致熒光淬滅。

  2. RNA完整性檢測

    • RNA IQ法區分完整RNA(RNA IQ# >7)與降解RNA(RNA IQ#<4),適用于qPCR或NGS實驗前的質量評估。

  3. 多通道檢測

    • 可同時運行多個檢測程序(如dsDNA HS與RNA IQ),提高通量。

五、注意事項

  1. 安全規范

    • 避免接觸熒光染料,如不慎接觸,立即用大量清水沖洗。

    • 儀器僅供科研使用,不可用于臨床診斷。

  2. 操作細節

    • 確保檢測管無氣泡,否則可能導致讀數偏低。

    • 避免在高溫或高濕環境下使用,可能影響熒光信號。

  3. 故障排除

    • 結果異常:檢查試劑是否過期、樣本是否稀釋過度。

    • 儀器無響應:重啟儀器,如仍無法解決,聯系技術支持。

六、用戶評價與支持

  • 用戶反饋

    • “Qubit 4的RNA IQ法顯著縮短了RNA質量評估時間,為NGS實驗節省了大量成本。"

    • “內置試劑計算器極大減少了人為誤差,適合高通量實驗室。"



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